Maschmeyer, I. et coll. Une puce à quatre organes pour la co-culture interconnectée à long terme de l`intestin humain, du foie, de la peau et des équivalents rénaux. Lab Chip 15, 2, 29 – 16 (2015). Le poumon-sur-puce a été assemblé, rempli de milieu de culture cellulaire, et placé dans un incubateur pendant au moins 2 h. Les puits d`entrée et de sortie ont été vidés, le puits d`entrée a été rempli de fluorescéine sodique (Sigma-Aldrich) dans le PBS (1 mg mL − 1), et les vannes ont été ouvertes pour initier l`échange de milieu. L`échange moyen a été surveillé en mode fluorescence avec un microscope vertical (Axioplan 2, Zeiss) équipé d`une caméra couleur (iDS UI-3370CP-C-HQ, iDS). Le film résultant a été traité à l`aide du logiciel d`analyse d`image Open-source Fiji (http://fiji.sc/Fiji). Après le recadrage à l`heure de début correcte, correspondant au point de temps lors de l`ouverture des vannes, un kymographe (intensité de pixel le long d`une ligne définie au fil du temps) a été créé du début du canal de sortie de la chambre de culture de cellules basales.

Le kymographe a été utilisé pour déterminer l`heure à laquelle le signal d`intensité n`a plus changé, ce qui correspond au remplissage complet de la chambre basale (c.-à-d. la fin de l`échange). Le ministère du travail des États-Unis (DOL) a mis à jour l`avis modèle pour les employeurs à utiliser pour informer les employés sur le programme d`assurance santé pour enfants (CHIP). Tous les employeurs qui ont des plans de santé collectifs sont tenus de distribuer un avis de CHIP au moins une fois par an aux employés vivant dans certains États. Il n`est pas nécessaire d`envoyer un autre avis aux travailleurs qui ont reçu la version antérieure au cours de la dernière année, mais les employeurs devraient utiliser l`avis mis à jour à l`avenir. C`est aussi un bon moment pour que les employeurs examinent leurs procédures de distribution des avis de CHIP. 16HBE14o-Cells ont été cultivées en MEM avec 10% de FBS jusqu`à ce qu`elles atteignent la confluence (3 jours, échange moyen journalier). Le surnageant apicale a été recueilli, et la puce a été fermée et remplie de MEM avec 1% de FBS (MEMs). La viabilité des cellules a été mesurée à l`aide du dosage PrestoBlue® (Life Technologies). En bref, après une incubation de 1 h avec PrestoBlue® (1:10 en MEMs), 50 μL de solution apicale ont été recueillis et transférés dans une plaque de 96 puits.

La lecture a été réalisée sur un lecteur de plaques multi-puits (M1000 Infinite, Tecan) à 570 nm d`excitation et 585 nm d`émission. La chambre apicale a été lavé avec du PBS avec du calcium, et le milieu dans la chambre de culture cellulaire apicale et basale a été remplacé par des MEMs. Les puces ont ensuite été transférées à un incubateur et reliées à la configuration électro-pneumatique externe. Elles étaient soit étirées (dynamiques) soit maintenues dans des conditions statiques. La viabilité a été mesurée quotidiennement dans le surnageant du côté apicale.