Περισσότερα από 1000 συνολικά εκθέματα περιλαμβάνει η συλλογή του Λαογραφικού Μουσείου Διδυμοτείχου που λειτουργεί από τις αρχές της δεκαετίας του 1980. Αντικείμενα της καθημερινότητας, εργαλεία τεχνητών και αγροτών, παραδοσιακές φορεσιές και υφαντά, ταξιδεύουν τους επισκέπτες στο Διδυμότειχο άλλων εποχών, στην καθημερινή ζωή των κατοίκων με τις εμπορικές και πολιτιστικές εκφάνσεις της.
Είδη ένδυσης, στρωσίδια του σπιτιού, παραδοσιακά κοσμήματα, εικόνες και εκκλησιαστικά σκεύη, σύνεργα παλιού τυπογραφείου, εργαλεία του ξυλουργού, του σιδερά του τσαγκάρη και πολλών άλλων παραδοσιακών επαγγελματιών της περιοχής στολίζουν, τοποθετημένα με μεγάλη επιμέλεια, τους τέσσερις ορόφους του Λαογραφικού Μουσείου Διδυμοτείχου.
Στην αυλή προϋπαντεί τους επισκέπτες ένα σησαμελαιοτριβείο, γιαχανάς όπως λέγεται στην περιοχή, για την παραγωγή σησαμέλαιου. Ένας παραδοσιακός αποστακτήρας ρακής, ένα παλιό κατάστιχο οινοπωλείου καθώς και δύο μαρμάρινα ανάγλυφα του «Θράκα ιππέα», συμπεριλαμβάνονται στα εκθέματα του Λαογραφικού Μουσείου Διδυμοτείχου.
Έντυπα και χειρόγραφα σπουδαίας αξίας μεταξύ αυτών προγράμματα εξετάσεων από τα εκπαιδευτήρια του Ζαππείου της Αδριανούπολης του 1882 και προγράμματα θεάτρου κοσμούν την συλλογή του αρχείου του Λαογραφικού Μουσείου Διδυμοτείχου.
Το Λαογραφικό Μουσείο Διδυμοτείχου στεγάζεται σε ένα τετραώροφο νεοκλασικό του 1900 στο κέντρο της πόλης και τα εκθέματά του καλύπτουν πλήρως την ποικιλομορφία των χαρακτηριστικών της ιστορικής πόλης.